Здравствуйте! Позвольте представиться - Геометрия ЖИЗНИ. Моя цель вместе с вами написать книги :
Пусть эти книги как ступени
Ведут к вершинам мастерства,
И как ключи откроют двери
К мечтам и замыслам Творца.
Тогда Создателю подобно
Ты станешь мыслью Мир менять,
Охватишь взглядом ты любовно
И Океан, и Землю-Мать.
Каждая глава будет посвящена способу/методу/инструменту , который улучшит Ваше и Ваших близких состояние=жизнь.
Вся информация носит научный характер: проверяемая и доказуемая.
Учитывая, что граждан России начинают травить все сильнее
(в Интернете,в т.ч. на КОНТЕе достаточно об этом информации, для понимания ВАЖНОСТИ ТЕМЫ, прошу изучить связь микрофлоры ЖКТ и Иммунной Системы Человека)
необходимо СРОЧНО вводить в рацион противоядия, нейтрализующие и очищающие.
По скорости и силе воздействия, а главное по возможности выращить это растение самим, а НЕ ПОКУПАТЬ В АПТЕКЕ, прошу впустить в Ваш РОД и огород семейство Гречишныx (Polygonaceae). При желании приобрести саженцы, сообщайте заранее, весной поедем все вместе в питомник. Глава дается в оригинальном виде - диссертации :
СОДЕРЖАНИЕ
СОКРАЩЕНИЯ ....................................................................................................... 5
ВВЕДЕНИЕ ............................................................................................................... 6
ГЛАВА 1. РАСТЕНИЯ РОДА POLYGONUM L. БОТАНИКО-ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ, ГЕОГРАФИЧЕСКОЕ РАСПРОСТРАНЕНИЕ. ХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ ....................................... 11
1.1 Ботаническая и экологическая характеристика видов рода Polygonum L. и их географическое распространение........................................................................... 11
1.2 Химический состав видов рода Polygonum L. .................................................. 15
1.3 Применение видов рода Polygonum L. в официальной и народной медицине.21
1.4 Фенольные соединения в медицине .................................................................. 24
ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 1 ..................................................................................... 29
ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ .................................................................... 30
2.1 Объект исследования ......................................................................................... 30
2.2 Методы исследования ........................................................................................ 30
2.2.1 Химические методы. ....................................................................................... 30
2.2.2 Хроматографические методы ........................................................................ 31
2.2.2.1 Методы бумажной и тонкослойной хроматографии .................................. 31
2.2.2.2 Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии ......................... 32
2.2.2.3 Газожидкостная хроматография.................................................................. 32
2.2.2.4 Метод хромато-масс-спектрометрии .......................................................... 33
2.2.2.5 Методы определения аминокислот ............................................................. 33
2.2.2.6 Методы определения антиоксидантной активности .................................. 34
2.2.3 Методы спектрального анализа.
2.2.3.1 Метод УФ-спектроскопии ........................................................................... 35
2.2.3.2 Атомно-абсорбционная спектрография ...................................................... 37
2.2.4 Титриметрические методы. ............................................................................ 37
2.2.5 Методы стандартизации сырья ...................................................................... 37
2.2.5.1 Отбор проб для анализа ...............................................................................
2.2.5.2Методы морфолого-анатомического исследования ................................... 38
2.2.5.3 Определение числовых показателей качества сырья ................................. 38
2.2.5.4 Определение микробиологической чистоты сырья ................................... 38
2.2.5.5Определение сроков хранения сырья .......................................................... 38
2.2.6 Фармакологические методы .......................................................................... 39
2.2.7 Статистическая обработка данных ................................................................ 39
ГЛАВА 3. ФИТОХИМИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ .................................... 40
3.1 Изучение флавоноидов и фенилпропаноидов .................................................... 41
3.1.1 Выделение и идентификация флавоноидов и фенилпропаноидов ................. 41
3.1.2 Количественное определение флавоноидов и фенилпропаноидов ................... 50
3.1.3 Количественное определение дубильных веществ ........................................ 60
3.2 Изучение полисахаридов ..................................................................................... 64
3.2.1 Качественный и количественный анализ. ........................................................ 64
3.3 Изучение каротиноидов ....................................................................................... 74
3.3.1 Качественный анализ каротиноидов ................................................................ 74
3.3.2 Количественное определение каротиноидов ................................................... 75
3.4 Изучение органических кислот ........................................................................... 77
3.4.1 Качественный анализ органических кислот .................................................... 77
3.4.2Количественное определение органических кислот ........................................ 78
3.5 Изучение элементного состава травы горца сахалинского ................................ 79
3.6 Изучение аминокислотного состава травы горца сахалинского ...................... 81
3.7 Определение антиоксидантной активности
ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 3 ......................................................................................... 86
ГЛАВА 4. ИНТРОДУКЦИОННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ГОРЦА САХАЛИНСКОГО В УСЛОВИЯХ КАВКАЗСКИХ МИНЕРАЛЬНЫХ ВОД ...................................................................................... 88
4.1 Репродукция семенами ...................................................................................... 88
4.2 Вегетативное размножение .............
4.3 Составление графиков роста и фенологических спектров ............................. 90
4.4 Сырьевая оценка и расчет объема возможных ежегодных заготовок ............ 94
ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 4 ........................................................................................ 96
ГЛАВА 5. СТАНДАРТИЗАЦИЯ СЫРЬЯ И РАЗРАБОТКА ПРОЕКТА ФСП НА ТРАВУ ГОРЦА САХАЛИНСКОГО ............................................................ 97
5.1 Морфолого-анатомические исследования травы горца сахалинского ........... 97
5.2 Определение товароведческих показателей сырья ........................................ 117
ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 5 ................................................................................... 124
ГЛАВА 6. ПОЛУЧЕНИЕ И СТАНДАРТИЗАЦИЯ ЭКСТРАКТА ГОРЦА САХАЛИНСКОГО СУХОГО ........................................................................... 126
6.1 Определение технологических характеристик сырья .................................... 126
6.2 Разработка технологической схемы получения экстракта горца сахалинского сухого ................................................................................... 127
6.3 Оценка качества экстракта .............................................................................. 130
ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 5 ...................................................................................... 132
ГЛАВА 7. ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ .......................... 133
7.1 Определение раздражающей активности экстракта ..................................... 133
7.2 Определение острой токсичности экстракта .................................................. 136
7.3 Изучение специфической активности экстракта ............................................ 138
ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 7 ...................................................................................... 142
ОБЩИЕ ВЫВОДЫ ............................................................................................. 143
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ .................................................................................. 145
ПРИЛОЖЕНИЯ 5
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы
Горец сахалинский (г. сахалинский) (рейноутрия) широко распространен на Дальнем Востоке Российской Федерации, в Китае, Корее и Японии. Данный вид горца используется довольно широко в народной медицине этих стран при онкологии, патологиях желудочно-кишечного тракта и некоторых сердечно - сосудистых заболеваниях. Также в научной литературе встречаются сведения об антиоксидантной активности фенольных соединений г. сахалинского. Каждый год наблюдается рост патологий желудочно-кишечного тракта, что приводит к повышению спроса на препараты для лечения заболеваний данной направленности. Учитывая тот факт, что синтетические препараты зачастую обладают нежелательными побочными эффектами, например, являются гепато- и нефротоксичными, а запасы дикорастущих лекарственных растений имеют объективную тенденцию к уменьшению, поиск новых растительных источников биологически активных соединений, в том числе обладающих желчегонной, мочегонной и антиоксидантной активностью, является актуальной задачей для фармацевтической и медицинской науки и практики. Сведения о химическом составе г. сахалинского, произрастающего на территории нашей страны, крайне ограничены, тем не менее, имеющиеся данные позволяют считать его перспективным для дальнейших фитохимических и сырьевых исследований с целью получения новых лекарственных средств.
Степень разработанности темы
Зарубежными учеными в результате изучения некоторых популяций г. сахалинского флоры Китая и Южной Кореи было установлено присутствие некоторых классов природных соединений, таких как флавоноиды, антрагликозиды, фенилпропаноиды, фенолкарбоновые кислоты. Г. сахалинский флоры России изучен крайне недостаточно. В основном проводились исследования особенности интродукции растения в условиях РСО.
Отсутствуют нормативные документы регламентирующие подлинность, доброкачественность сырья; нет результатов интродукционных исследований в условиях Ставропольского края, отсутствуют сведения о химическом составе вегетативных, репродуктивных органов г. сахалинского и лекарственных средствах на его основе.
Цели и задачи исследования
Цель настоящего исследования – фармакогностическое изучение травы г. сахалинского, разработка проекта ФС на траву для расширения сырьевой базы лекарственных средств, обладающих желчегонной и мочегонной активностью.
Для достижения цели необходимо было решить следующие задачи:
1. Провести исследования по интродукции г. сахалинского в условиях Кавказских Минеральных Вод. Определить фенологические фазы и составить фенологические спектры растения.
2. Провести фитохимическое исследование травы г. сахалинского.
3. Определить качественный состав и количественное содержание флавоноидов, фенилпропаноидов, дубильных веществ и полисахаридов.
4. Предложить технологическую схему получения сухого экстракта травы горца сахалинского.
5. Провести определение острой токсичности и специфической активности (желчегонное и мочегонное действия) экстракта из травы г. сахалинского сухого.
6. Изучить морфолого-анатомическое строение сырья (листья, стебель, цветки) с целью установления его диагностических признаков.
7. Провести стандартизацию и разработать нормативную документацию на траву г. сахалинского.
Научная новизна и теоретическая значимость работы
Впервые были проведены интродукционные исследования г. сахалинского в условиях Краснодарского края. Определенны основные фенологические фазы и составлены фенологические спектры, характеризующие растения 1-го, 2-го и 3-го годов развития, и объем возможных заготовок, который составляет от 38±6 т воздушно-сухого сырья с 1 га.
Фитохимические исследования позволили установить содержание в траве г. сахалинского таких групп биологически активных соединений как флавоноиды, фенилпропаноиды, дубильные вещества, полисахариды, каротиноиды, аминокислоты, органические кислоты. Методами ВЭЖХ, БХ, ТСХ и спектрального анализа в траве г. сахалинского интродуцированного в условиях Кавказских Минеральных Вод впервые идентифицированы: рутин, дигидрокверцетин, цикориевая кислота, кофейная кислота, неохлорогеновая кислота, феруловая кислота, галловая кислота, катехин и эпикатехин. Впервые изучен качественный состав и количественное содержание состав флавоноидов, фенилпропаноидов и дубильных веществ в разные фенологические фазы развития растений. Методами ГЖХ, ВЭЖХ и хромато-масс-спектрального анализа, впервые был определен мономерный состав полисахаридов травы г. сахалинского, а также количественное содержание и молекулярно массовое распределение полисахаридов.
Впервые изучен макро- и микроэлементный состав травы г. сахалинского.
Впервые разработана технологическая схема и проведены фармакологические исследования сухого экстракта травы г. сахалинского, подтверждающие наличие у него желчегонного и мочегонного действия.
Практическая значимость. Внедрение результатов исследования
1. Разработан и апробирован в центре научно-практической гомеопатии и традиционной медицины НИИ проект ФСП «Горца сахалинского трава».
2. Установлены диагностические макро и микроскопические признаки сырья (травы) характерные для г. сахалинского, позволяющие проводить его достоверную идентификацию
3. Проведена стандартизация травы г. сахалинского в соответствии с современными требованиями, предъявляемыми к качеству лекарственного растительного сырья.
4. Разработаны технологическая схема получения экстракта сухого и методика его стандартизации.
5. Определенна острая токсичность и специфическая активность (желчегонное и мочегонное действия) экстракта сухого травы г. сахалинского
Методология и методы исследования
Методологической основой диссертационной работы явилось выбор объекта исследования с использованием принципа филогенетического родства, проведенные в широком плане фармакогностические исследования (макро- и микроскопические, фитохимические, ресурсоведческие, товароведческие). Фитохимические исследования проводились с использованием современных методов анализа: тонкослойная хроматография (ТСХ), бумажная хроматография (БХ), высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ), газожидкостная хроматография (ГЖХ), газожидкостная хромато-масс-спектрометрия (ГХ-МС), спектрометрия в видимой, УФ и ИК областях и др. Для выявления фармакологической активности были использованы биологические методы анализа.
Основные положения, выносимые на защиту
1. Результаты фитохимического изучения травы г. сахалинского;
2. Результаты интродукционных исследований г. сахалинского в условиях Краснодарского края
3. Методики стандартизации сырья травы г. сахалинского и экстракта сухого на его основе;
4. Технологическая схема получения сухого экстракта травы г. сахалинского;
5. Результаты определения острой токсичности и специфической активности (желчегонное и мочегонное действия)
Степень достоверности и апробация результатов
Достоверность результатов исследований определяется объемом и содержательностью изученной информационной базы, глубиной и объективностью исследований, применением современных методов физико-химического анализа и статистической обработки полученных результатов.
ГЛАВА 1. Растения рода Polygonum L. Ботанико-экологические особенности, географическое распространение. Химический состав
1.1. Ботаническая и экологическая характеристика видов рода Polygonum L. и их географическое распространение
Порядок Polygonales - гречихоцветные включает в себя семейство Polygonaceae Juss. – гречишные; род Polygonum L. - Горец насчитывает около 300 видов. Горец сахалинский Polygonum sachalinense F. Schmidt [134] некоторые ботаники относят к роду Fallopia Adans. – Fallopia sachalinensis (F. Schmidt) Ronse Decr. и Reynoutria sachalinensis (Fr. Schmidt) Nakai [151,153].
Растения рода - многолетние травянистые растения, реже полукустарники, кустарники и лианы. Цветки мелкие, обоеполые, часто протандричные в колосовидных или метельчатых соцветиях, иногда пазушные. Стебли прямостоячие или распростертые, иногда вьющиеся. Листья простые, очередные. Опыляются насекомыми, нередко самоопыление. Плоды трёхгранные орешки, заключённые в разросшийся околоцветник; распространяются животными, ветром, водой. В 1 г содержится до 100 семян. Растения рода распространены по всему земному шару, но преимущественно в умеренных поясах.
Что касается названия рода Polygonum, то оно произошло от греческих слов «polys» — много и «gonos» — колено; встречаются также другие названия рода - Persicaria, Fallopia, Reynoutria, Tovara [45].
В культуре встречается около 20 видов. Некоторые виды используются в цветоводстве.
На территории России хорошо адаптировались многие виды горцев. Они также оказались довольно неприхотливыми и успешно культивируются [56] это:
Polygonum hydropiper L. – Горец перечный
Однолетнее травянистое растение высотой до 50 см. Цветет горец перечный в июле-августе, плодоносит в августе-сентябре. Свежие листья растения обладают остро-жгучим вкусом, что и определило название растения.
Произрастает горец перечный по всей лесной зоне бывшего СССР, кроме Крайнего Севера и Крыма. Основные районы сбора и заготовки: Северный Кавказ, Краснодарский край, Ростовская и Воронежская области. На Дальнем Востоке г. перечный распространен в Приморье, Приамурье, на Курильских островах и в южных районах Сахалинской области; местами образует небольшие заросли.
Polygonum persicaria L.- Горец почечуйный
Однолетнее травянистое растение. Период цветения июнь-август. Растение не имеет запаха, на вкус горьковато-терпкое.
Горец почечуйный широко распространен на территории бывшего Советского Союза, включая Дальний Восток, Сибирь, Среднюю Азию и Кавказ. На Дальнем Востоке это Приморье, Сахалин и южные районы Хабаровского края. Растет горец почечуйный на лугах, в рвах, у дорог и как сорняк. Однако, растение предпочитает сырые места: по берегам рек и канав, на влажных полях и огородах.
Polygonum aviculare L. - Горец птичий
Однолетнее травянистое растение. Цветет и плодоносит горец птичий с середины весны до глубокой осени. Горец птичий встречается повсеместно. Растет как сорняк, на выпасах по берегам водоемов, в садах, огородах, парках, лесополосах [63].
Polygonum alpinum All. - Горец альпийский
Разрастается в мощные раскидистые кусты высотой до 150 см. Цветение приходится на середину июля.
Polygonum ajanense (Regel&Tiling) Grig. - Горец аянский
Многолетнее растение до 30-40 см высотой. Ареал: Сибирь, Дальний Восток, Япония, Китай. Растет на каменистых склонах, щебнистых осыпях в гольцовом и подгольцовом поясах гор.
Polygonum weyrichii Fr.- Schmidt Горец Вейриха
В диком виде разрастается в заросли высотой до 200 см на травянистых склонах Сахалина, Курил и Японии. Цветет в конце августа. Этот вид горца неприхотливый и зимостойкий.
Polygonum viviparum L. - Горец живородящий
Многолетнее растение до 50 см высотой. Цветет в июне-августе. Произрастает в болотистой местности и в лесах, а также встречается в горах в высокогорье [2,151].
Экологическую характеристику рода Горец можно дать, опираясь на труды российского ученого-агронома и ботаника Л.Г. Раменского, проводившего широкомасштабные исследования по изучению видового состава лугов и физических условий их произрастания.
Всего Л.Г. Раменским изучены пять экологических характеристик («шкал») луговых сообществ:
1) шкала «увлажнения»
Данная шкала характеризует степень общей влажности местообитания. Это не буквальная сиюминутная влажность почвы или воздуха, а некоторая комплексная, интегральная характеристика, включающая в себя среднегодовую сумму осадков, степень увлажнения почвы и тип растительного сообщества.
По этой шкале для горцев характерна почва от среднестепной (горец вьюнковый) до прибрежно-водной (горец земноводный). Причем чем больше объем популяции, тем больше горцы становятся требовательны к наличию влаги в почве. Горец земноводный в единичном экземпляре спокойно уживается на почве сухолуговой увлажненности, однако с ростом популяции требование к увлажнению переходит к болотно-луговому и выше.
2) шкала «переменности увлажнения»
Данная шкала характеризует постоянство водного баланса местности, где расположено данное луговое сообщество. Горцы по этой шкале требуют средне и умеренно обеспеченную переменность увлажнения.
3) шкала «активного богатства и засоленности почв»
Активное богатство почвы - это ее обеспеченность элементами питания растений в подвижной и усвояемой растениями форме (растворимые соли, адсорбированные коллоидами основания, легко минерализуемые соединения азота и др.).
По этой шкале горцы уживаются как на небогатой (мезотрофной), так и на слабо и среднесолончаковых разновидностях почв.
4) шкала «аллювиальности»
Данная шкала характеризует степень «аллювиальности» той или иной местности, где произрастает данное луговое сообществ. Аллювий – это речные отложения, соответственно аллювиальность – это подверженность данной местности периодическим затоплениям речной водой, или последствия таких затоплений в прошлом.
Горцы слабо аллювиальные, и поэтому различные наводнения практически не сказываются на жизни популяции.
5) шкала «пастбищной дигрессии»
Данная шкала характеризует интенсивность сбоя травяного покрова травоядными животными. Разрабатывая данную шкалу, Л.Г. Раменский изучал, в первую очередь, влияние на травяной покров крупного рогатого скота. Однако,данная шкала характеризует также и естественный сбой травяного покрова дикими травоядными животными, а также (правда не столь точно) – вытаптывание травяного покрова людьми. По этой шкале влияние выпаса на популяции горцев не сказывается или это влияние очень слабое [22].
1.2. Химический состав видов рода Polygonum L.
Химический состав горцев разнообразен и значителен, что во многом определяет их разностороннее применение и распространение в медицинской и фармацевтической практике [27]. Данные о химическом составе представителей рода Polygonum L., представлены в таблице 1.
Таблица 1 – Химический состав представителей рода Polygonum L. Название растения Идентифицированные соединения Литературный источник
Горец укороченный
P. abbreviatum Kom. Кемпферол, кверцетин, цианидин. [104]
Горец аянский
P.ajanenseL. Гликозиды кемпферола, кверцетина, мирицетина; цианидин. [104]
Горец лисохвостниковый P.alopecuroid es Turcz. ex Meissn. Кемпферол, кверцетин. [104]
ПРОДОЛЖЕНИЕ СЛЕДУЕТ
Оценили 3 человека
8 кармы